重组慢病毒包装试剂盒
CAT.NO: PRJ-LV Kit001

产品概述

普瑞金重组慢病毒包装试剂盒,是重组慢病毒包装工作的革命性产品,将重组慢病毒包装过程中的细胞、培养基、转染试剂有机整合,极大地简化了重组慢病毒包装工作,可以在哺乳动物细胞(悬浮293)中快速制备出较高滴度的重组慢病毒产品。该试剂盒系统基于普瑞金在重组慢病毒领域的产业化平台,经驯化后的293细胞,在293基础培养基中转染后进行高密度培养,通过后期补加293补料培养基维持较高细胞活率,达到提高重组慢病毒滴度的作用。该试剂盒由293-LV转染试剂完成,转染效率能够达到50%-70%,重组慢病毒滴度可达108TU/ml。该试剂盒包括293TS细胞、293基础培养基、293补料培养基、293-LV转染试剂。

名称 货号 规格 数量 保存
293TS cell PRJ-LV00C 1×107cells/ml,1ml/支 2支 干冰运输
293-LV转染试剂 PRJ-LV00P 2ml/支 2支 2℃~8℃,避光
293-基础培养基 PRJ-LVJ10 1000ml/瓶 2瓶 2℃~8℃,避光
293-补料培养基 PRJ-LVB01 100ml/瓶 2瓶 2℃~8℃,避光

用途

只能用于科研,不能用于临床。

主要信息

293TS细胞

名称 货号 规格 保存
293TS cell PRJ-LV00C 1×107cells/ml,1ml/支 干冰运输

293TS 细胞是购买ATCC的293T(CRL-3216)细胞经过驯化后的,采用无血清培养基进行悬浮培养,是专门驯化用于慢病毒载体的制备。

293-LV基础培养基

名称 货号 规格 保存
293-LV基础培养基 PRJ-LVJ10 1000ml/瓶 2℃~8℃,避光

该培养基属于是一款用于悬浮293类细胞培养和转染过程的无血清、无动物源成分、含酚红、不含谷氨酰胺的基础培养基,在使用前需加入谷氨酰胺一起使用。

293-LV补料培养基

名称 货号 规格 保存
293-LV补料培养基 PRJ-LVB01 100ml/瓶 2℃~8℃,避光

293-LV补料培养基是无动物源成分的植物蛋白水解物,适合用于病毒载体制备中转染后的补料,可以维持细胞活率、提高慢病毒载体的产量。

293-LV转染试剂

名称 货号 规格 规格 保存
293-LV转染试剂 PRJ-LV00P 2ml/支 2支 2℃~8℃,避光

293-LV-转染试剂是阳离子聚合物转染试剂,可以稳定高效地制备慢病毒载体。

共转染

1. 共转染的过程当中,三质粒或四质粒系统的质粒总量=2×(转染细胞上清液体积数值)μg,例如待转染的细胞上清液体积为 100ml,则总质粒用量为 200μg,转染试剂用量为 300μg(DNA:转染试剂=1:3)。
2. 转染过程简图: 3. 转染放大方案

转染体积 孵育用培养基(DNA+转染试剂)体积 DNA 用量 转染试剂用量
20ml 0.2ml+0.2ml 20 μg 60 μl
50ml 0.5ml+0.5ml 50 μg 150 μl
100ml 0.8ml+0.8ml 100 μg 300 μl
500ml 2.0ml+2.0ml 500 μg 1500 μl
1000ml 5.0ml+5.0ml 1000 μg 3000 μl
2000ml 10ml+10ml 2000 μg 6000 μl

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